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BiFC技術可以直觀、快速地判斷目標蛋白在活細胞中的定位和相互作用。將蛋白在某些特定的位點切開,形成不發熒光的N和C端2個多肽,稱為N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。這2個片段在細胞內共表達或體外混合時,不能自發地組裝成完整的熒光蛋白,在該熒光蛋白的激發光激發時不能產生熒光。但是,當這2個熒光蛋白的片段分別連接到1組有相互作用的目標蛋白上,如果目標蛋白質之間有相互作用,則在激發光的激發下,產生該熒光蛋白的熒光。反之,若蛋白質之間沒有相互作用,則不能被激發產生熒光。
實驗流程
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服務內容
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采用擬南芥原生質體為受體細胞,結果更加可靠,更具說服力。
同時可以采用煙草葉肉表皮細胞作為受體細胞,性價比高,實驗周期短。
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